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中国癌症防治杂志 ›› 2024, Vol. 16 ›› Issue (3): 285-294.doi: 10.3969/j.issn.1674-5671.2024.03.04
摘要： 目的 探讨SH3结构域结合富含谷氨酸的蛋白质（SH3 binding glutamic acid⁃rich protein like，SH3BGRL）对胃癌细胞增殖、迁移能力的影响及其作用机制。方法 基于TCGA、GTEx及GEO数据库，通过生物信息学分析SH3BGRL在胃癌组织及正常胃黏膜上皮组织中的表达情况；通过HPA数据库获取SH3BGRL蛋白在胃癌组织及正常胃黏膜上皮组织中的表达图谱；并基于TCGA数据库的SH3BGRL表达水平进行高、低表达分组，分析其对胃癌患者预后、免疫细胞浸润和免疫治疗的影响。通过临床标本IHC染色观察SH3BGRL蛋白在胃癌中的表达情况；采用RT⁃qPCR检测SH3BGRL在胃癌细胞系和正常胃黏膜上皮细胞GES⁃1中的表达水平。将胃癌HGC⁃27及NCI⁃N87细胞进行siRNA转染分为si⁃NC组（转染阴性对照组）、si⁃SH3BGRL组（沉默SH3BGRL组），并通过RT⁃qPCR及Western blot验证是否转染成功。采用CCK⁃8及 Transwell 实验检测细胞增殖和迁移能力，随后诱导THP⁃1单核细胞分化为M0巨噬细胞，并将分化后的M0巨噬细胞和转染后的胃癌细胞进行共培养，采用RT⁃qPCR及细胞免疫荧光检测共培养之后M2巨噬细胞标志物的改变，并采用RT⁃qPCR检测SH3BGRL沉默胃癌细胞中CSF1的表达水平。结果 生物信息学分析结果显示，与正常胃黏膜上皮组织相比，SH3BGRL在胃癌组织中表达上调（均P<0.01），且SH3BGRL高表达者总生存期和无进展生存期比SH3BGRL低表达的患者短（均P<0.01）。SH3BGRL高表达者M2巨噬细胞浸润比例更高，与免疫治疗低应答率相关（均P<0.01）。IHC染色结果表明，SH3BGRL蛋白在胃癌组织中表达上调（P<0.001）。与GES⁃1细胞相比，SH3BGRL在胃癌HGC⁃27及NCI⁃N87细胞中的mRNA表达水平均显著上调（均P<0.01）。与si⁃NC组相比，沉默SH3BGRL后HGC⁃27和NCI⁃N87细胞的增殖能力明显下降（均P<0.01），HGC⁃27细胞迁移能力显著下降（P<0.01）。M0巨噬细胞与沉默SH3BGRL的HGC⁃27及NCI⁃N87共培养后，M2巨噬细胞标志物CD163、CD206及Arg1均下调（均P<0.01）。在HGC⁃27及NCI⁃N87细胞中沉默SH3BGRL后，NF⁃κB信号通路的靶基因CSF1显著下调（均P<0.01）。结论 SH3BGRL在胃癌中表达上调，沉默SH3BGRL能抑制胃癌细胞增殖和迁移，其机制可能与抑制M2巨噬细胞极化进而形成免疫抑制肿瘤微环境有关。
中图分类号:
